تهیه اسلاید میکروسکوپ یک تکنیک ضروری در میکروسکوپ است که امکان بررسی نمونه های کوچک و شفاف را در زیر میکروسکوپ فراهم می کند. این شامل چندین مرحله است تا اطمینان حاصل شود که نمونه به درستی نصب شده و روی اسلاید نگهداری می شود. این را هم توجه کنید که، نکات و تکنیک های مختلفی وجود دارد که می‌تواند کیفیت اسلاید آماده شده را افزایش دهد.
هشت مرحله برای تهیه اسلاید میکروسکوپ:
- جمع آوری مواد: قبل از شروع، تمام مواد لازم را جمع آوری کنید، از جمله اسلایدهای میکروسکوپ، ورقه های پوششی، نمونه(ها)، محیط نصب (مانند آب، گلیسیرین، محیط نصب)، مواد رنگی (اگر مورد نیاز)، پیپت یا قطره چکان، و میکروسکوپ.
- تمیز کردن اسلایدها: مطمئن شوید که لام های میکروسکوپ شما تمیز و عاری از گرد و غبار یا زباله هستند. آنها را با بهره‌گیری از یک ماده تمیز کننده مناسب (مانند اتانول) تمیز کنید و با دستمال کاغذی یا کاغذ لنز بدون پرز پاک کنید.
- آماده کردن نمونه: نمونه خود را با توجه به نوع نمونه ای که با آن کار می کنید آماده کنید. این ممکن است شامل تثبیت، رنگ آمیزی یا برش نمونه بر اساس نیازهای آزمایشی شما باشد.
- نمونه نصب: یک قطره از محیط نصب را در مرکز یک لام میکروسکوپ تمیز قرار دهید. نمونه آماده شده خود را با بهره‌گیری از فورسپس یا قطره چکان به آرامی روی قطره انتقال دهید. از به دام افتادن حباب های هوا بین نمونه و لام خودداری کنید.
- پوشش با روکش: برای جلوگیری از به دام افتادن حباب های هوا، یک ورقه را با دقت روی نمونه با زاویه 45 درجه قرار دهید. به آرامی ورقه را روی اسلاید پایین بیاورید، اجازه دهید با محیط نصب تماس پیدا کند و به آرامی فشار دهید تا هرگونه حباب هوا از بین برود.
- واسطه نصب اضافی را بردارید: با بهره‌گیری از یک دستمال یا کاغذ لکه، به آرامی اطراف لبه‌های روکش را فشار دهید تا محیط نصب اضافی را جدا کنید و از نفوذ آن به شیء میکروسکوپ در حین مشاهده جلوگیری کنید.
- اسلاید برچسب: اسلاید را با اطلاعات مرتبط، از جمله نام نمونه، تاریخ، و هرگونه جزئیات اضافی که ممکن است برای ارجاع بعدی مهم باشد، برچسب بزنید.
- اجازه دهید اسلاید خشک شود: قبل از نگهداری یا بررسی آن در زیر میکروسکوپ، اجازه دهید لام آماده شده کاملا خشک شود. این از لکه دار شدن یا آسیب دیدن نمونه در حین جابجایی جلوگیری می کند.
38 نکته برای تهیه اسلایدهای میکروسکوپ:
- مطمئن شوید که یک منطقه کار تمیز و عاری از گرد و غبار و آلودگی است.
- از دستکش برای جلوگیری از آلودگی نمونه یا اسلاید استفاده کنید.
- از لمس سطوح شیشه ای اسلایدها و روکش ها با دست خالی خودداری کنید تا اثر انگشت به حداقل برسد.
- اگر از نمونه‌های زنده استفاده می‌کنید، آنها را با دقت کنترل کنید و مطمئن شوید که به اندازه کافی بیهوش یا بی‌حرکت شده‌اند.
- محیط نصب مناسب را بر اساس ماهیت نمونه خود انتخاب کنید (مثلا بر پایه آب برای موجودات زنده).
- برای نصب دائمی، از رسانه های نصبی استفاده کنید که حفظ طولانی مدت و شفافیت را فراهم می کند.
- اگر از عوامل رنگ‌آمیزی استفاده می‌کنید، از پروتکل‌ها و دستورالعمل‌های تعیین‌شده مخصوص نوع نمونه خود پیروی کنید.
- از قطره چکان یا پیپت با نوک ظریف برای قرار دادن دقیق مایعات استفاده کنید.
- مطمئن شوید که نمونه شما به درستی روی اسلاید جهت گیری شده است، مخصوصا اگر نیاز به مشاهده ویژگی های نامتقارن باشد.
- برای جلوگیری از رقیق شدن محیط نصب، آب اضافی نمونه های مرطوب را قبل از نصب بردارید.
- از بارگذاری بیش از حد اسلاید با مقادیر بیش از حد نمونه یا محیط نصب خودداری کنید.
- از مقاطع نازک یا برش های نمونه های بزرگتر برای شفافیت و تجسم بهتر استفاده کنید.
- برای جلوگیری از آسیب رساندن به نمونه های ظریف، فشار ملایمی را هنگام قرار دادن ورقه های پوششی اعمال کنید.
- اگر حباب‌های هوا در زیر پوشش گیر افتاده‌اند، به آرامی ضربه بزنید یا فشار کمی وارد کنید تا آنها را بردارید.
- از میکروسکوپ تشریح یا ذره بین برای کمک به دستکاری و جهت گیری نمونه استفاده کنید.
- اگر از چندین نمونه در یک اسلاید استفاده می‌کنید، فضای کافی بین آنها برای جلوگیری از همپوشانی باقی بگذارید.
- اسلایدها را در جعبه های اسلاید یا قفسه های اسلاید ذخیره کنید تا از گرد و غبار و آسیب محافظت کنید.
- برای جلوگیری از خراب شدن، از نگهداری اسلایدها در شرایط خیلی مرطوب یا خشک خودداری کنید.
- برای اطمینان از کیفیت تصویربرداری بهینه، میکروسکوپ خود را به طور مرتب تمیز و نگهداری کنید.
- هنگام کار با اهداف بزرگنمایی بالا برای بهبود وضوح، از روغن غوطه ور استفاده کنید.
- هنگام بهره‌گیری از غوطه وری در روغن، مطمئن شوید که پوشش در تماس مستقیم با روغن باشدبرای فوکوس دقیق.
- اسلایدها و روکش‌ها را پس از استفاده به‌طور کامل تمیز کنید تا هرگونه ماده یا لکه‌های باقی‌مانده نصب را پاک کنید.
- اگر از برچسب‌های چسب استفاده می‌کنید، مطمئن شوید که به طور ایمن به اسلاید متصل شده‌اند و در مشاهده اختلال ایجاد نمی‌کنند.
- اجازه دهید نمونه های رنگ آمیزی شده قبل از نصب تحت آبگیری و پاکسازی مناسب قرار گیرند.
- از یک برس یا سوزن ظریف برای دستکاری نمونه های کوچک در حین نصب استفاده کنید.
- از قرار گرفتن در معرض حرارت بیش از حد در طول آماده‌سازی نمونه خودداری کنید، زیرا ممکن است منجر به اعوجاج یا تخریب شود.
- اسلایدها را به صورت عمودی ذخیره کنید تا از جابجایی یا آسیب دیدن لام‌های پوششی جلوگیری کنید.
- مطمئن شوید که میکروسکوپ شما برای مشاهدات دقیق به درستی کالیبره و تراز شده است.
- محیط نصب مورد استفاده برای هر اسلاید را برای مراجعات بعدی پیگیری کنید.
- از تکنیک‌های تخصصی مانند کدو حلوایی، اسمیر، یا کدو حلوایی و پخش کردن برای انواع مختلف نمونه‌ها استفاده کنید.
- هنگام تهیه پایه های مرطوب، از یک اسلاید مقعر استفاده کنید یا یک چاه با فاصله دهنده های چسب ایجاد کنید تا نمونه مایع را در خود جای دهد.
- برای نمونه های شکننده، لبه های روکش را با لاک ناخن شفاف تقویت کنید تا از جابجایی تصادفی جلوگیری کنید.
- از قرار گرفتن طولانی مدت اسلایدهای نصب شده در معرض نور مستقیم خورشید یا منابع نور شدید که ممکن است باعث محو شدن یا آسیب شود، خودداری کنید.
- اسلایدها را در محیطی با دمای کنترل شده ذخیره کنید تا خرابی احتمالی در طول زمان به حداقل برسد.
- اسلایدهای ذخیره شده را به طور مرتب از نظر علائم رشد یا زوال قارچ بازرسی کنید و در صورت شناسایی اقدامات لازم را انجام دهید.
- آماده سازی اسلاید خود را ثبت کنید، از جمله جزئیات مربوط به نمونه، تکنیک های رنگ آمیزی و مشاهدات انجام شده.
- از میکروسکوپ‌شناس‌های با تجربه راهنمایی بخواهید یا برای پروتکل‌های آماده‌سازی نمونه‌های خاص به ادبیات مربوطه مراجعه کنید.
- برای دستیابی به نتایج بهینه، حوصله و دقت را در حین آماده سازی اسلاید تمرین کنید.
منابع :
- انجمن میکروسکوپی آمریکا - یک انجمن حرفه ای که به ترویج پیشرفت علوم میکروسکوپی و تصویربرداری اختصاص دارد. وب سایت آنها منابع ارزشمند، انتشارات و دستورالعمل های مربوط به تکنیک های میکروسکوپی را ارائه می دهد.
- موسسه ملی بهداشت (NIH) - NIH یک موسسه تحقیقاتی مشهور است که اطلاعات زیادی در مورد موضوعات مختلف علمی از جمله میکروسکوپ ارائه می دهد. وب سایت آنها دارای مواد آموزشی و پروتکل های مربوط به آماده سازی نمونه برای میکروسکوپ است.
- Journal of Microscopy - مجله علمی معتبری که مقالات پژوهشی و نقدهای اصلی در زمینه میکروسکوپ را منتشر می کند. این طیف گسترده ای از تکنیک های میکروسکوپی، از جمله پروتکل های آماده سازی نمونه را پوشش می دهد.
توجه داشته باشید که مراجع فوق بر اساس اعتبار و اعتبار در زمینه میکروسکوپ ارائه شده است.
|
[چهارشنبه 1404-01-20] [ 02:21:00 ق.ظ ]
|
